Com calibrar una pipeta

Content

• etapes
• 1a part Comprova la calibració
• 2ª part. Calcula els resultats

La pipeta és un equip de laboratori que s’utilitza per mesurar i transferir un líquid. La precisió de mesura d’una pipeta és molt important perquè la menor diferència de volum pot distorsionar els resultats experimentals. És important calibrar les pipetes cada mes per assegurar la precisió. Aquest procés és útil per comprovar si el dispositiu proporciona volums específics de líquid i, si no, podeu reparar-lo ràpidament.

etapes

1a part Comprova la calibració

1. 
   

   
   Reuneix el material necessari. Per garantir la precisió d’una pipeta, necessitareu una pipeta, puntes, aigua destil·lada, un vas de precipitats, un termòmetre, un plat de pes i una bàscula. El saldo que s’ha d’utilitzar ha de tenir intervals micromètrics per calibrar la pipeta amb un valor màxim d’1 µL.
   • El volum màxim d’aigua a utilitzar és de 5 ml. Aboqueu l’aigua al vas de vidre.
   • Els consells per utilitzar-los han d’estar en bon estat i s’han d’adaptar bé a la vostra pipeta.

2. 
   

   
   Mesureu la temperatura de l’aigua destil·lada. Introduïu el termòmetre a l'aigua destil·lada i deixeu-ho almenys 60 segons. Si la substància vermella del termòmetre es continua movent, espereu un minut més. Passat un minut, noteu la temperatura. Traieu el termòmetre i després eixugueu-lo.
   • És important conèixer la temperatura de l’aigua perquè l’utilitzaràs per fer els càlculs necessaris per comprovar la calibració.

3. 
   

   
   
   
   Col·loqueu la cassola de pesatge i zero la bàscula. L’ideal seria que la seva escala tingui una porta i una habitació aïllada. Poseu el plat de pes a la cambra i tanqueu-lo. Si la vostra escala no té una habitació ni una porta, simplement col·loca la tassa al damunt. Premeu el botó zero o tara i espereu que la pantalla mostri zero.
   • La reducció de l'escala anul·la el pes del contenidor de plàstic i només pesa el contenidor.

4. 
   

   
   Prepareu la pipeta. Netegeu-lo amb etanol primer i assegureu-vos que el final no estigui obstruït. Col·loca la punta adequada al final de la pipeta i fixa el volum que s’ha de provar.
   • Proveu el volum més petit i el volum més gran de líquid que es pot treure de la pipeta.

5. 
   

   
   
   
   Esbandiu l’embocadura abans de començar. Premeu el botó fins a la primera parada i introduïu la punta a l'aigua destil·lada a uns 2 mm de profunditat. Allibereu el botó per extreure el líquid i, després, dispenseu el líquid prement el botó. Repetiu aquest pas tres vegades per netejar completament la punta de la pipeta abans de l’ús.
   • Premeu el botó fins a la segona parada per dispensar el líquid restant a la punta, i després traieu la pipeta de l'aigua.

6. 
   

   
   Dibuixeu el volum de calibració. Amb el broquet que acabeu de treure de l'aigua, premeu el botó fins a la primera parada. Introduïu la punta a l'aigua destil·lada fins a una alçada de 2 mm i allibereu el botó per aspirar el líquid. Espereu aproximadament un segon abans de treure-la.
   • Assegureu-vos que la boquilla estigui completament submergida durant la durada del procés de succió. No hauria de tenir bombolles al seu interior, en cas contrari els resultats seran incorrectes.

7. 
   

   
   Dispenseu el líquid al plat de pesar. Poseu la punta contra la part inferior del contenidor i premeu el botó fins a la primera parada. Orienteu un altre punt lleugerament lluny del primer i premeu el botó fins a la segona parada. Mentre mantingueu premut el botó, aixequeu l’extrem del pesant.
   • Mantingueu la punta de la pipeta mentre l’utilitzeu de nou per a proves de calibració posteriors.

8. 
   

   
   Observeu el pes indicat a la bàscula. Tanqueu la porta de la bàscula si utilitzeu una escala amb una cambra de pesatge. Espereu fins que s’aturen els números. Per gravar el pes mostrat a la pantalla.
   • És important esperar que els números ja no es desplacin a la pantalla abans de gravar el pes. Si no ho enteneu, els vostres càlculs estaran equivocats.

9. 
   

   
   Repetiu aquest procés com a mínim 10 vegades. Zero l’escala, esbandida la punta, xucla el mateix volum, dispensar el líquid i registra el pes. Anoteu el pes de l’aigua destil·lada per al mateix volum i calculeu la mitjana de tots els pesos que heu registrat.
   • Podeu repetir aquest procés amb diferents volums, sempre que noteu el pes d'aigua destil·lada per a cada volum diverses vegades.

2ª part. Calcula els resultats

1. 
   

   
   Escriviu la fórmula per calcular el volum dispensat. La fórmula per calcular el volum de líquid alliberat per la pipeta és V = w x Z, essent el pes de l’aigua, Z el coeficient de conversió en funció de la densitat de l’aigua i V el volum d’aigua alliberada.
   • La variable Z es pot obtenir calculant la densitat de l'aigua mitjançant la temperatura registrada al començament de l'experiment.
   • Per exemple, si la temperatura de l’aigua era de 23 ° C, el valor de Z és d’1.003 5 μg / mg.

2. 
   

   
   Calculeu el pes mitjà de totes les proves. Suposem que heu pesat el volum d’aigua distribuït 10 vegades. Per calcular la mitjana d’aquests valors registrats, sumar-los i dividir la suma per deu.
   • Per a un volum de 10 μL d'aigua, aquí teniu els resultats obtinguts després de les proves del nostre exemple: 9.89, 10.02, 10.01, 9.99, 10.04, 9.95, 9.96, 9.99 , 10,01 i 9,98.
   • La mitjana és de 9,984, que és (9,89 + 10,02 + 10,01 + 9,99 + 10,04 + 9,95 + 9,96 + 9,99 + 10,01 + 9,98) / 10 = 99,84 / 10.

3. 
   

   
   Substituïu les variables pel seu valor en l'equació i resolgueu-lo. Un cop conegut el valor de les variables, inseriu-les a l’equació i resolgueu-lo. Per trobar el volum d’aigua alliberat, multiplica el pes mitjà de totes les proves realitzades pel valor Z.
   • Tornem a l’exemple anterior: V = w * Z = 9.984 x 1.003 5 = 10.019.

4. 
   

   
   Calculeu la precisió de la pipeta. Utilitzeu l’equació A = 100 x V_avg/ V₀ per calcular la precisió de la pipeta. A indica la precisió de la pipeta, V_avg és la mitjana del volum calculat i V₀ representa el valor establert a la pipeta. Hauríeu d’obtenir entre un 99 i un 101% de precisió.
   • Si es calibra la pipeta, el valor calculat s’hauria d’aproximar al valor real establert a la pipeta.
   • Encara amb el nostre exemple, obtenim una precisió del 100,19 per cent, és a dir, A = 100 x V_avg/ V₀ = 100 x 10.019 / 10 = 100 x 1.001 9.
   • Tenint en compte aquest resultat de precisió, podem dir que aquesta pipeta està ben calibrada.

5. 
   

   
   Si cal, contacteu amb un servei de reparació i calibració. Si la prova de calibració no és concloent, no utilitzeu la pipeta per fer experiments. La pipeta és un instrument de laboratori molt fràgil i car. Si trobeu un problema de calibració que us trobeu més enllà, poseu-vos en contacte amb una empresa especialitzada en la reparació i calibratge de les pipetes.
   • També podeu contactar amb l’empresa que fabrica la marca de pipetes que feu servir per obtenir un servei de reparació.